Is-sistema RPA-CRISPR/Cas12a f'dan l-istudju tikseb detezzjoni rapida (30–40 min), ultra-sensittiva (kopja 1/μL) HCMV billi timmira l-ġene UL123 espress bikri-, li tegħleb il-metodi konvenzjonali fl-ittestjar tal-kampjuni kliniċi. infezzjonijiet, b'mod partikolari f'pazjenti immunokompromessi, u jenfasizza l-fattibilità ta' dijanjostika bbażata fuq CRISPR-għal titjieb il-ġestjoni ta' mard relatat-l-HCMV. Is-sempliċità u l-effiċjenza tal-assaġġ jenfasizzaw il-potenzjal tiegħu bħala punt-ta'-għodda ta' kura għal settings limitati ta' riżorsi-.
Mudelli ta 'siti ta' amplifikazzjoni RPA u għażla ta 'kit.
(A) Disinn tal-primer RPA rigward il-post tal-frammenti tal-amplifikazzjoni. Il-vleġeġ jindikaw il-pożizzjonijiet tal-bażi mill-bidu sat-tmiem tal-framment amplifikat bil-primers P1-P6.
(B) L-immaġni tal-elettroforesi tal-ġel tal-agarose tal-prodott RPA amplifikat b'6 settijiet ta 'primer HCMV.
(C) Screening ta 'l-effiċjenza ta' amplifikazzjoni ta 'kits RPA minn kumpaniji differenti. P: Primer, NC: Kontroll Negattiv.
Ir-riżultati indikaw li l-kit AmpFuture wera l-ogħla effiċjenza ta 'amplifikazzjoni.
Tqabbil ta' rati pożittivi ta' MIRA-CRISPR/Cas12a, PCR - Fluorescent Probe Method u qPCR f'kampjuni kliniċi.
Ġbarna kampjuni tad-demm u l-awrina minn 48 pazjent kliniku. Id-DNA Ġenomika ġiet estratta minn dawn il-kampjuni bl-użu tal-Kit tad-DNA Ġenomika TIANamp, u r-riżultati tal-iskoperta UL122 ġew analizzati permezz tal-metodu tas-sonda fluworexxenti tal-PCR-. Meta nqabblu r-riżultati tagħna ma 'dijanjosi kliniċi, il-metodi tagħna identifikaw 6 kampjuni pożittivi li kienu negattivi fit-testijiet kliniċi.
